CGT既細胞與基因治療是利用(yòng)基因治療載體(tǐ)将外源的治療性基因轉導至細胞，再通過外源基因的轉錄和翻譯，改變細胞原有(yǒu)基因表達以治療疾病的方法。細胞基因治療是繼小(xiǎo)分(fēn)子、大分(fēn)子靶向療法之後的新(xīn)一代精(jīng)準療法，在生物(wù)醫(yī)藥領域尤其是癌症及遺傳病治療領域極具(jù)發展前景。

截止至2023年8月，FDA批準的CGT産(chǎn)品已有(yǒu)32種。國(guó)家藥監局已批準100餘個細胞和基因治療産(chǎn)品開展臨床試驗。但是CGT作(zuò)為(wèi)新(xīn)一代生物(wù)技(jì )術革命産(chǎn)物(wù)，一個痛點是生産(chǎn)成本非常高，相應而生的降低CGT相關終端産(chǎn)品的成本也是讓CGT更好造福人類的關鍵。Polyplus緻力于為(wèi)客戶提供從原料質(zhì)粒、轉染試劑、人力成本、儀器設備等多(duō)層面降低成本的高性價比轉染試劑。

大規模病毒生産(chǎn)的金标準

Polyplus——PEIpro®

PEIpro®特點

l  兼容多(duō)種細胞培養系統和商(shāng)業化培養基；

l  DNA用(yòng)量更少，經濟高效大批量生産(chǎn)病毒載體(tǐ)；

l  三個質(zhì)量等級的産(chǎn)品适合各個階段的應用(yòng)需求，擁有(yǒu)完全GMP等級的産(chǎn)品；

l  基于PEI優化的轉染試劑，适合貼壁和懸浮系統的LV、AAV、RV等多(duō)種病毒大規模生産(chǎn)。

1、适用(yòng)于多(duō)種細胞培養系統

無論基于細胞培養的系統和生産(chǎn)規模如何，對于慢病毒和AAV, PEIpro®和PEIpro®-HQ的有(yǒu)效病毒載體(tǐ)産(chǎn)量分(fēn)别優于10⁷IG/mL和10⁹vg /mL。

2、低量DNA生産(chǎn)高量病毒

與另一種基于PEI的試劑和磷酸鈣轉染相比，PEIpro®用(yòng)更少的試劑和更低的DNA量産(chǎn)生更多(duō)的病毒。将HEK-293懸浮細胞以1 × 10⁶/ml的濃度接種于無血清培養基中(zhōng)，按照推薦方案用(yòng)PEIpro®、和另一種基于PEI的試劑轉染。AAV-2使用(yòng)無輔助包裝(zhuāng)系統生産(chǎn)，轉染72h使用(yòng)GFP報告基因表達測量病毒滴度。右圖：在無血清培養基中(zhōng)生長(cháng)的貼壁HEK-293細胞中(zhōng)産(chǎn)慢病毒，每75cm2燒瓶用(yòng)15ugDNA和30ul PEIpro®，轉染48h後通過滴定上清液測定病毒産(chǎn)量。

3、更少的試劑用(yòng)量

與其他(tā)PEI相比，PEIpro®所需試劑較少，DNA用(yòng)量也較低。将HEK-293懸浮細胞以1 × 10⁶/ml的濃度接種于無血清培養基中(zhōng)，用(yòng)PEIpro®、PEI MAX®和L-PEI 25 kDa轉染。轉染48 h後用(yòng)常規熒光素酶法檢測熒光素酶的表達。

懸浮培養體(tǐ)系中(zhōng)用(yòng)于生産(chǎn)rAAV的新(xīn)一代轉染試劑

Polyplus——FectoVIR®-AAV

FectoVIR®-AAV特點

l  有(yǒu)GMP級别産(chǎn)品；

l  合成型，不含任何動物(wù)源成分(fēn)；

l  在懸浮細胞體(tǐ)系中(zhōng)達到驚人的病毒産(chǎn)量；

l  适合大規模生産(chǎn)，轉染複合物(wù)工(gōng)作(zuò)體(tǐ)積小(xiǎo)、更穩定；

l  DNA用(yòng)量更少，1 L FectoVIR ® -AAV 轉染試劑足以轉染 500 L 細胞培養物(wù)。

應用(yòng)數據

1、極高的病毒産(chǎn)量

 上圖：對比其他(tā)産(chǎn)品，FectoVIR®-AAV可(kě)提高10倍病毒産(chǎn)量

下圖：FectoVIR®-AAV通過高生産(chǎn)率大大降低制造成本。對在2000L STR中(zhōng)生産(chǎn)10E18的AAV進行成本建模，基于

DSP後3O% AAV回收率，使用(yòng)FectoVIR®-AAV生産(chǎn)10E18的AAV需要4個生物(wù)反應器，使用(yòng)PElpro ®需要7個生物(wù)反應器，使用(yòng)其他(tā)PEI需要22個生物(wù)反應器。

2、更少的DNA用(yòng)量

FectoVIR®-AAV在提高産(chǎn)量的同時可(kě)使DNA用(yòng)量減少25%(+33% vs PEIpro®)

3、适合大規模生産(chǎn)

左圖：複合物(wù)工(gōng)作(zuò)體(tǐ)積：由10%減至1%。右圖：複合物(wù)穩定性: 可(kě)延長(cháng)至6小(xiǎo)時

4、兼容多(duō)種商(shāng)業化細胞培養基

使用(yòng)在幾種合成培養基中(zhōng)制每的FectoVIR®-AAV/DNA複合物(wù)轉染懸浮HEK-293T胞後72小(xiǎo)時，收獲重組AAV-2。

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