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3D細胞培養 | 基質(zhì)膠是個啥神器?

2023/11/24 12:01:26      點擊:

3D細胞培養,也就是讓細胞在三維立體(tǐ)培養環境中(zhōng)生長(cháng),是近年來細胞培養的熱門方法:

因為(wèi)常規的2D培養是平面環境,與細胞在體(tǐ)内的立體(tǐ)微環境存在一定差異,造成了2D培養在臨床前藥物(wù)有(yǒu)效性和毒性篩選中(zhōng)具(jù)有(yǒu)一定的局限性,嚴重依賴動物(wù)模型。

随着3D培養出現,細胞培養模型更接近體(tǐ)内生理(lǐ)環境,和動物(wù)模型在藥物(wù)試驗效果上具(jù)有(yǒu)很(hěn)高的一緻性,可(kě)減少對動物(wù)實驗的依賴,縮短研發周期,它勢必成為(wèi)細胞培養的趨勢和潮流。

圖片來源:Fig.1doi: 10.1089/adt.2014.573
2D,3D培養機理(lǐ)差異
細胞吸附和伸展的程度2D培養中(zhōng),細胞隻在接觸面單側吸附,許多(duō)細胞逐步扁平化,有(yǒu)的分(fēn)裂異常,有(yǒu)的喪失分(fēn)化表型;3D培養中(zhōng),細胞的整個表面都可(kě)吸附,建立起類似體(tǐ)内的的細胞-基質(zhì)與細胞-細胞間相互作(zuò)用(yòng)。
細胞的極性極性對組織的結構和活性分(fēn)子的定向分(fēn)泌很(hěn)重要。像Transwell這種可(kě)通透支持物(wù),是體(tǐ)外重建具(jù)有(yǒu)活體(tǐ)極性和分(fēn)泌功能(néng)的上皮細胞3D模型的有(yǒu)用(yòng)工(gōng)具(jù)。
基因表達和mRNA剪切黑色素瘤細胞3D培養基因上調的模式和在體(tǐ)内的腫瘤中(zhōng)一緻;而2D培養時會展現出與上面不同的獨特基因表達模式。細胞培養方式還會影響到整合素mRNA的表達和蛋白的生物(wù)合成。
3D培養方案
3D細胞培養基質(zhì),首先根據有(yǒu)沒有(yǒu)支架分(fēn)成兩大類,每類又(yòu)有(yǒu)細分(fēn)的技(jì )術和來源特點:

目前應用(yòng)最廣的是天然基質(zhì)膠,來源于EHS小(xiǎo)鼠肉瘤,它可(kě)以模拟體(tǐ)内細胞其底膜的結構、組成,具(jù)有(yǒu)類似的物(wù)理(lǐ)特性和功能(néng)。可(kě)以促進細胞的粘附和分(fēn)化,在體(tǐ)内實驗中(zhōng)可(kě)以提高人腫瘤細胞在裸鼠上的生長(cháng)速度。
基質(zhì)膠被廣泛應用(yòng)于如下領域:
支持細胞生長(cháng)和分(fēn)化
細胞粘附
血管新(xīn)生
體(tǐ)外細胞遷移/侵襲
體(tǐ)内成瘤
CultrexBME 産(chǎn)品線(xiàn)
R&D Systems擁有(yǒu)業界最好品質(zhì)的活性蛋白生長(cháng)因子,現在更為(wèi)您帶來3D培養最佳基質(zhì)膠CultrexBME産(chǎn)品線(xiàn),是您細胞培養的品質(zhì)之選。

通用(yòng)型的Cultrex Original BME,廣泛應用(yòng)于2D,3D培養,細胞粘附,細胞侵襲實驗;
專為(wèi)幹細胞貼壁和維持設計的Cultrex Stem Cell Qualified BME;
3D培養的專用(yòng)型Cultrex 3-D Culture Matrix BME;
異種移植或腫瘤移植的Cultrex BME Type 3;
對于組織化培養的不同需求,那些皮實的類器官類型,可(kě)以使用(yòng)Cultrex Organoid Qualified BMEType 2;而較難培養的類型,我們有(yǒu)專門的Cultrex Organoid Qualified BMEType R1。
PathClear 3-D 産(chǎn)品線(xiàn)
PathClear産(chǎn)品線(xiàn)為(wèi)您提供了更高規格的無病原控制:
内毒素<8EU/mL
無細菌/真菌污染(依據美國(guó)藥典第24版,第71章,37℃培養14天進行檢測)
無支原體(tǐ)污染(PCR驗證)
對包括LDEV在内的總共31病原體(tǐ)/病毒檢測,确保無污染
屬于PathClear産(chǎn)品線(xiàn)的3D培養産(chǎn)品如下:

其中(zhōng)type2型具(jù)有(yǒu)比基本型更高的抗拉強度,而生長(cháng)因子濃度方面,有(yǒu)正常濃度和低濃度兩款供選擇,後者适用(yòng)于對基質(zhì)成分(fēn)要求嚴格的實驗,如信号通路和細胞因子研究等。
如此全面的産(chǎn)品線(xiàn),必能(néng)滿足您的所需。
Cultrex應用(yòng)案例
案例一
2012年 5月Nature Protocol有(yǒu)一篇重要的介紹如何使用(yòng)基質(zhì)膠促進小(xiǎo)鼠體(tǐ)内更快成瘤的實驗流程文(wén)章(doi:10.1038/nprot.2012.053),對Cultrex基質(zhì)膠出色的效果進行了認證:

Fig.1Rafael et al., Nature Protocol 2012
(a,c)用(yòng)100μL 基質(zhì)膠混合2x105 PC3細胞,接種到SCID小(xiǎo)鼠中(zhōng)9天後血管和腫瘤細胞的生長(cháng)情況,(c)箭頭所指為(wèi)CD31标記的表皮細胞,顯示了腫瘤内廣泛的血管形成。(b)為(wèi)不加PC3細胞的對照。

Fig.2 Rafael et al., NatureProtocol 2012
在SCID小(xiǎo)鼠乳房内脂肪墊中(zhōng)接種106MDA-MB-468後9天的腫瘤生長(cháng)對比。(a)為(wèi)混合了低生長(cháng)因子無酚紅的基質(zhì)膠的實驗組,(b)為(wèi)不加基質(zhì)膠的對照組。基質(zhì)膠的存在不但加快了腫瘤生長(cháng),也促進了血管形成。
案例二

案例三

總結

全面的産(chǎn)品線(xiàn),多(duō)方驗證的優異品質(zhì),R&D Systems的Cultrex®BME基質(zhì)膠産(chǎn)品線(xiàn)必能(néng)滿足您的3D細胞培養所需,我們将以專業的産(chǎn)品和服務(wù)助力您的2D,3D細胞培養,組織化培養,幹細胞維持和分(fēn)化等實驗。

北京百靈克生物(wù)科(kē)技(jì )有(yǒu)限責任公(gōng)司
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